2.2. Secuenciación del ADN
Actividad
Otra técnica muy usada en ingeniería genética es la secuenciación del ADN recombinante, que consiste en la determinación de la secuencia de nucleótidos de un ADN concreto.
El método más usado se denomina técnica de terminación de cadena de Sanger, hoy en día perfeccionado y conocido como la técnica del didesoxi.
Pregunta Verdadero-FalsoEsta técnica es como elaborar un puzle. Para poder realizarla necesitas de algunas herramientas que ya conoces. Fíjate en las imágenes del vídeo.
¿Puedes decir si son verdaderas las opciones que se te plantean seguidamente?
Verdadero Falso
Verdadero Falso
La técnica de la didesoxi se denomina así ya que utiliza didesoxirribonucleótidos (ddNTP), es decir, nucleótidos sin el grupo alcohol (OH) del carbono 3'.
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| Imagen 14. Elaboración propia |
Si te fijas en la imagen, ambos nucleótidos se diferencian en el carbono que aparece en posición 3‘. El desoxinucleótido tiene, en esta posición, unido un grupo OH. El didesoxinucleótido lo ha perdido y sólo tiene unido un hidrógeno.
Cuando añadimos un nucleótido a una cadena de ADN, éste se unirá por el extremo 3', por el OH; sin embargo, si añadimos un didesoxinucleótido, no se podrá unir, ya que le falta el grupo alcohol.
Pregunta Verdadero-FalsoVerdadero Falso
Verdadero Falso
Verdadero Falso
Ya sabes necesitamos ADN molde, un cebador, dexosinucleótidos y didesoxinucleotidos. Al añadir la ADN-polimerasa, comienza la unión de los nucleótidos al cebador, pero cesa el incorporarse un didesoxinucleótido.
Se produce un conjunto de cadenas dobles cuyas longitudes dependen de la situación del didesoxinucleótido que se incorpora a continuación. Se colocan en un autoradiograma (un gel en el que se muestran las bandas y sobre el que puede leerse la secuencia).
Realiza este ejercicio sobre la técnica de didesoxi.
Caso de estudio
En este ejercicio nos muestran un gel de secuenciación por el método del didesoxi.
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| Imagen 17. Autor: Desconocido. Licencia Creative Commons |
¿Puedes obtener la secuencia del ADN?
Objetivos
- ¿Quieres medir tus conocimientos sobre la técnica didesoxi? En este ejercicio podrás evaluar lo que conoces de esta técnica.
- Si deseas repasar los conocimientos aprendidos, aquí tienes una presentación realizada por el profesor Jano con materiales para biología de 2º de Bachillerato.