3.1. Clonación del ADN

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El método de la clonación del ADN en células consiste en unir in vivo fragmentos de ADN de procedencia muy diversa con secuencias de ADN capaces de replicarse de manera autónoma.

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En la técnica de la clonación molecular o génica no se clonan células, pero sí las utilizan para clonar fragmentos de ADN. Se las llama células hospedadoras. Las células hospedadoras procariotas que se suelen utilizar son bacterias, es decir, el ADN deseado se introduce en el ADN bacteriano, de forma que cuando la bacteria se reproduzca hará múltiples copias de ese ADN.

¿Quieres saber cómo se consigue introducir un fragmento de ADN deseado dentro de una bacteria?

Se utilizan pequeñas moléculas de ADN, a las que se les llama vectores de clonación o de clonado, que pueden autorreplicarse de manera independiente del ADN de la célula huésped. Se utilizan dos tipos de vectores de clonación: plásmidos (la imagen de tu izquierda) y bacteriófagos. Lo primero que hay que conseguir es insertar el gen deseado en estos vectores.

Imagen 19. Autor: Fibonacci. Licencia Creative Commons
Imagen 20. Autor: Ortisa. Licencia Creative Commons

En algunas ocasiones se utilizan también cósmidos, plásmidos construidos artificialmente que contiene el gen COS del fago lambda. Los cósmidos pueden ser empaquetados en partículas del fago lambda por infección en E. coli bacteriófago.

Imagen 21. Autora: Lourdes Luengo. Licencia Creative Commons

Repasa con este ejercicio estos conceptos.

La introducción de un ADN extraño en bacterias, ya sea de forma natural o por vectores, se llama transformación.

Autora: Lourdes Luengo

Si el vector es un virus, la transformación recibe el nombre de transducción, mira en la animacion como el bacteriófago inserta el ADN en la bacteria.

Al dividirse esta bacteria transformada se obtienen muchas células iguales, que llevan ese ADN, a las que se llaman clones. El conjunto de clones obtenido se llama biblioteca genómica o genotecas. En esta animación puedes ver como se crea una.

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¿Cómo puede saberse si una bacteria ha incorporado el vector de clonación que lleva el fragmento de ADN que queremos clonar? Gracias a genes llamados marcadores. Un marcador puede ser un gen que da a la bacteria resistencia a un antibiótico. Los plásmidos naturales no tienen estos marcadores, sino que se añaden artificialmente.

Puedes ver esta presentación, con más información sobre estos marcadores.


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Entre las técnicas de genética molecular se incluyen además otras dos que son la clonación y la transferencia. Además, se necesita un vector.

Autor imagen: Nupedia. Licencia Creative Commons

¿Qué es la clonación de un gen?

  
Consiste en hacer copias de un fragmento entero del gen dentro del propio organismo mediante técnicas artificiales.
Clonar un gen significa aislarlo y mantenerlo puro en el tubo de ensayo, o en una molécula mayor de ADN de forma estable y práctica por más tiempo.
Clonar un gen implica hacer muchas copias del mismo, pero sin fragmentar el AND que lo contiene y sin aislarlo de la célula.

¿En qué consiste la transferencia de genes?

 

Autor: Seb951. Licencia Creative Commons

 

  
No es más que el conjunto de técnicas que permite la inserción de genes de un organismo en otro o bien del propio organismo.
Consiste en mover los genes de un lugar a otro del laboratorio para aplicarle diferentes técnicas.
Se trata de mover una secuencia de ADN sin purificar del núcleo de una célula en el citoplasma de la misma.

¿Qué es un plasmido?

 

 

Autor: Fibonacci. Licencia Creative Commons

 

  
Son moléculas circulares o liniales de ADN que se encuentran fuera del genoma de la célula y que pueden replicarse y transcribirse de forma independiente al cromosoma celular.
Son fragmentos helicoidales de ADN que sólo se encuentran en plantas.
Son largas  cadenas de ADN asociadas a proteínas y circulares que se encuentran en el interior de las bacterias.

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